วีดีโอ: อะไรทำหน้าที่เป็นเวกเตอร์โคลนดีเอ็นเอ?
2024 ผู้เขียน: Miles Stephen | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-15 23:41
มีหลายประเภท โคลนเวกเตอร์ แต่มากที่สุด อย่างธรรมดา ของที่ใช้แล้วเป็นพลาสมิดดัดแปลงพันธุกรรม โคลนนิ่ง โดยทั่วไปจะดำเนินการครั้งแรกโดยใช้ Escherichia coli และ โคลนเวกเตอร์ ใน E. coli ได้แก่ พลาสมิด แบคทีเรีย (เช่น phage λ) คอสมิดและโครโมโซมประดิษฐ์จากแบคทีเรีย (BACs)
ยังถามอีกว่าเวกเตอร์ในการโคลนดีเอ็นเอคืออะไร?
ในโมเลกุล การโคลนนิ่ง , NS เวกเตอร์ คือ ดีเอ็นเอ โมเลกุลที่ใช้เป็นพาหะนำสารพันธุกรรมแปลกปลอมไปยังอีกเซลล์หนึ่ง ที่ซึ่งมันสามารถถูกจำลองแบบและ/หรือแสดงออกได้ (เช่น พลาสมิด คอสมิด แลมบ์ดาฟาจ) NS เวกเตอร์ ประกอบด้วยต่างประเทศ ดีเอ็นเอ เรียกว่ารีคอมบิแนนท์ ดีเอ็นเอ.
รู้ยัง คุณจะโคลนเวกเตอร์ได้อย่างไร? ขั้นตอนการทดลอง
- เรียกใช้ PCR และทำให้ผลิตภัณฑ์ PCR บริสุทธิ์: เรียกใช้ PCR เพื่อขยาย DNA ของเม็ดมีดของคุณ
- แยกแยะ DNA ของคุณ:
- แยกส่วนแทรกและเวกเตอร์ของคุณโดยการทำให้บริสุทธิ์ด้วยเจล:
- ยึดส่วนแทรกของคุณลงในเวกเตอร์ของคุณ:
- การเปลี่ยนแปลง:
- แยกพลาสมิดสำเร็จรูป:
- ตรวจสอบ Plasmid ของคุณโดยลำดับ:
ในเรื่องนี้ pBR322 ทำงานเป็นเวกเตอร์โคลนอย่างไร
pBR322 พลาสมิด pBR322 เป็นหนึ่งในพลาสมิดตัวแรกที่ใช้สำหรับวัตถุประสงค์ของ การโคลนนิ่ง . ประกอบด้วยยีนสำหรับการดื้อต่อเตตราไซคลินและแอมพิซิลลิน การแทรก DNA ที่ไซต์การจำกัดเฉพาะ สามารถ ยับยั้งยีนของ tetracycline (ผลที่เรียกว่าการยับยั้งการแทรกซึม) หรือการดื้อยาแอมพิซิลลิน
เทคนิคใดที่อนุญาตให้ทำสำเนา DNA ส่วนเฉพาะจำนวนมากได้อย่างรวดเร็ว
ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส