Cre lox สามารถย้อนกลับได้หรือไม่?
Cre lox สามารถย้อนกลับได้หรือไม่?

วีดีโอ: Cre lox สามารถย้อนกลับได้หรือไม่?

วีดีโอ: Cre lox สามารถย้อนกลับได้หรือไม่?
วีดีโอ: Conditional gene expression using the Cre Lox FLEx vector switch! 2024, อาจ
Anonim

เหตุการณ์การรวมตัวใหม่ทั้งหมดเป็นสื่อกลางโดย FLP หรือ เคร เป็น ย้อนกลับได้ . ในขณะที่การตัดชิ้น DNA ขนาบข้างด้วย loxP /FRT เป็นที่นิยมมากกว่าการนำกลับมาใช้ใหม่ การผกผันและการผกผันซ้ำเกิดขึ้นด้วยความน่าจะเป็นเดียวกัน NS loxP และไซต์เป้าหมาย FRT ได้รับการออกแบบเพื่อหลีกเลี่ยงปัญหาการกลับด้านนี้

แล้ว CRE LOX ทำงานอย่างไร?

เคร - Lox การรวมตัวใหม่เกี่ยวข้องกับการกำหนดเป้าหมายของลำดับเฉพาะของ DNA และประกบกันด้วยความช่วยเหลือของเอนไซม์ที่เรียกว่า ครีคอมบิเนส . NS เคร โปรตีนเป็น DNA เฉพาะไซต์ รีคอมบิเนส ที่สามารถกระตุ้นการรวมตัวของ DNA ระหว่างตำแหน่งเฉพาะในโมเลกุล DNA

นอกจากนี้ Cre recombinase ทำหน้าที่อะไร? Cre recombinase คือ ไทโรซีน รีคอมบิเนส เอนไซม์ที่ได้จากแบคทีเรีย P1 เอนไซม์ (38kDa) เป็น สมาชิกของกลุ่ม integrase ของไซต์เฉพาะ รีคอมบิเนส และมัน เป็น เป็นที่ทราบกันดีว่ากระตุ้นเหตุการณ์การรวมตัวใหม่เฉพาะไซต์ระหว่างไซต์การจดจำดีเอ็นเอสองแห่ง (ไซต์ LoxP)

เกี่ยวกับเรื่องนี้ tamoxifen กระตุ้น Cre อย่างไร?

ทาม็อกซิเฟน การบริหาร กระตุ้น Cre การแสดงออกของรีคอมบิเนสภายใต้โปรโมเตอร์ α-MHC คล้ายกับในหนูด้านบน ซึ่งช่วยให้สามารถลบ Dicer ที่จำเพาะต่อกล้ามเนื้อหัวใจได้ในเวลาที่กำหนด

ไซต์ loxP คืออะไร?

เว็บไซต์ LoxP เป็นลำดับทิศทาง 34 bp ประกอบด้วยการรับรู้ 13 bp สองครั้ง เว็บไซต์ คั่นด้วยพื้นที่ตัวเว้นวรรค 8 bp ลำดับไม่ได้เกิดขึ้นตามธรรมชาติในจีโนมที่รู้จักใดๆ นอกเหนือจาก P1 bacteriophage และนานพอที่พวกมันไม่น่าจะเกิดขึ้นโดยบังเอิญ