การตกตะกอนของเอทานอลกำจัดโปรตีนหรือไม่?

2024 ผู้เขียน: Miles Stephen | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-15 23:41

การสกัดด้วยฟีนอลคลอโรฟอร์ม (ดู Kirby, 2500) ตามด้วย การตกตะกอนของเอทานอล , เป็นวิธีการดั้งเดิมในการ กำจัดโปรตีน จาก ดีเอ็นเอ ตัวอย่าง. ที่ละลายน้ำได้ ดีเอ็นเอ แบ่งเป็นเฟสน้ำในขณะที่ โปรตีน ทำให้เสียสภาพเมื่อมีตัวทำละลายอินทรีย์ จึงคงอยู่ในระยะอินทรีย์

เอทานอลตกตะกอนโปรตีนหรือไม่?

ฝนเอทานอล เป็นวิธีหนึ่งในการลบ SDS และอื่นๆ แอลกอฮอล์ สิ่งเจือปนที่ละลายน้ำได้จาก โปรตีน ตัวอย่างที่มีน้อยที่สุด โปรตีน การสูญเสีย. รายงานนี้ตรวจสอบ โปรตีน การกู้คืนหลังจาก การตกตะกอนของเอทานอล เช่นเดียวกับ ความสามารถในการละลาย ของ SDS ในอากาศเย็น 90% เอทานอล.

ต่อมา คำถามคือ คุณทำเอทานอลตกตะกอนอย่างไร? ขั้นตอนพื้นฐานคือเกลือและ เอทานอล ถูกเติมลงในสารละลายที่เป็นน้ำซึ่งบังคับให้ หยาดน้ำฟ้า ของกรดนิวคลีอิกออกจากสารละลาย หลังจาก หยาดน้ำฟ้า กรดนิวคลีอิก สามารถ แล้วแยกจากส่วนที่เหลือของสารละลายโดยการหมุนเหวี่ยง

ผู้คนยังถามอีกว่า การตกตะกอนของเอทานอลจะกำจัดนิวคลีโอไทด์อิสระหรือไม่?

การสกัดฟีนอลคลอโรฟอร์มและ ปริมาณน้ำฝนเอทานอล สำหรับ การกำจัด ของโปรตีนและส่วนใหญ่ของ นิวคลีโอไทด์อิสระ , ฟีนอล: สกัดคลอโรฟอร์มและ การตกตะกอนของเอทานอล ของการถอดเสียง RNA เป็นวิธีที่แนะนำ

RNA ถูกลบออกจาก DNA อย่างไร?

RNA การปนเปื้อนสามารถขจัดออกได้โดยการเพิ่ม RNase A 2 ไมโครลิตร (10 มก./มล., Fermentas) ลงใน 20 ไมโครลิตรของ ดีเอ็นเอ ละลายในบัฟเฟอร์ TE (Tris–EDTA, pH = 8.0) และฟักเป็นเวลา 3-4 ชั่วโมงที่ 37 C