การโคลนโมเลกุลมีขั้นตอนอย่างไร?

2024 ผู้เขียน: Miles Stephen | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2023-12-15 23:41

เวิร์กโฟลว์การโคลนพื้นฐานประกอบด้วยสี่ขั้นตอน:

• การแยกเป้าหมาย ดีเอ็นเอ เศษ (มักเรียกว่าส่วนแทรก)
• Ligation ของเม็ดมีดในความเหมาะสม การโคลนนิ่ง เวกเตอร์ สร้างรีคอมบิแนนท์ โมเลกุล (เช่น พลาสมิด)
• การเปลี่ยนรูปของรีคอมบิแนนท์พลาสมิดไปเป็นแบคทีเรียหรือโฮสต์อื่นที่เหมาะสมสำหรับการขยายพันธุ์

คำถามก็คือ การโคลนยีน 4 ขั้นตอนมีอะไรบ้าง?

ในโปรโตคอลการย่อยของเอ็นไซม์จำกัดแบบคลาสสิกและโปรโตคอลการโคลน ligation การโคลนชิ้นส่วน DNA ใดๆ ที่เกี่ยวข้องโดยพื้นฐานแล้วเกี่ยวข้องกับสี่ขั้นตอน:

• การแยก DNA ที่น่าสนใจ (หรือ DNA เป้าหมาย)
• ligation,
• การถ่ายเท (หรือการแปลง) และ.
• ขั้นตอนการคัดกรอง/คัดเลือก

ประการที่สอง การโคลนทำได้ทีละขั้นตอนอย่างไร? คำแนะนำของคุณเกี่ยวกับการจำลองแบบในโลกแห่งความเป็นจริง

1. ขั้นตอนที่ 1: ดึง DNA ออกจากผู้บริจาค
2. ขั้นตอนที่ 2: เตรียมเซลล์ไข่
3. ขั้นตอนที่ 3: ใส่วัสดุเซลล์โซมาติก
4. ขั้นตอนที่ 4: โน้มน้าวให้ไข่ได้รับการปฏิสนธิและปลูกฝัง
5. ขั้นตอนที่ 5: ทำซ้ำจนกว่าจะมีชีวิต

คำถามก็คือ ลำดับเหตุการณ์ที่ถูกต้องสำหรับการโคลนโมเลกุลคืออะไร?

ตามมาตรฐาน การโคลนโมเลกุล การทดลอง การโคลนนิ่ง ใดๆ ดีเอ็นเอ ส่วนสำคัญเกี่ยวข้องกับเจ็ดขั้นตอน: (1) การเลือกสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์และ การโคลนนิ่ง เวกเตอร์, (2) การเตรียมเวกเตอร์ ดีเอ็นเอ , (3) การเตรียมการของ ดีเอ็นเอ เป็น โคลน , (4) การสร้างลูกผสม ดีเอ็นเอ , (5) การแนะนำของ recombinant ดีเอ็นเอ เข้าสู่สิ่งมีชีวิต (6)

ดีเอ็นเอลูกผสมมีขั้นตอนอย่างไร?

โดยทั่วไปแล้ว a ดีเอ็นเอลูกผสม เทคโนโลยีมีห้า ขั้นตอน : (1) ตัดตามที่ต้องการ ดีเอ็นเอ โดยไซต์จำกัด (2) ขยายสำเนายีนโดย PCR (3) ใส่ยีนเข้าไปในเวกเตอร์ (4) ถ่ายโอนเวกเตอร์ไปยังสิ่งมีชีวิตที่เป็นโฮสต์ และ (5) ได้รับผลิตภัณฑ์ของ รีคอมบิแนนท์ ยีน (รูปที่