สารบัญ:

รีเอเจนต์ที่จำเป็นสำหรับ PCR คืออะไร และแต่ละรีเอเจนต์มีหน้าที่อะไร?
รีเอเจนต์ที่จำเป็นสำหรับ PCR คืออะไร และแต่ละรีเอเจนต์มีหน้าที่อะไร?

วีดีโอ: รีเอเจนต์ที่จำเป็นสำหรับ PCR คืออะไร และแต่ละรีเอเจนต์มีหน้าที่อะไร?

วีดีโอ: รีเอเจนต์ที่จำเป็นสำหรับ PCR คืออะไร และแต่ละรีเอเจนต์มีหน้าที่อะไร?
วีดีโอ: EP21: หลักการของเทคนิค PCR 2024, เมษายน
Anonim

มีห้าพื้นฐาน รีเอเจนต์ หรือส่วนผสมที่ใช้ใน PCR : แม่แบบดีเอ็นเอ PCR ไพรเมอร์, นิวคลีโอไทด์, PCR บัฟเฟอร์และ Taq polymerase โดยทั่วไปจะใช้ไพรเมอร์เป็นคู่ และ DNA ระหว่างไพรเมอร์ทั้งสองจะถูกขยายระหว่าง PCR ปฏิกิริยา.

นอกจากนี้ สิ่งที่จำเป็นสำหรับปฏิกิริยา PCR คืออะไร?

ส่วนประกอบพื้นฐานของa ปฏิกิริยา PCR รวมถึงแม่แบบ DNA, ไพรเมอร์, นิวคลีโอไทด์, DNA polymerase และบัฟเฟอร์ เทมเพลต DNA มักจะเป็น DNA ตัวอย่างของคุณ ซึ่งมีขอบเขต DNA ที่จะขยาย การออกแบบรองพื้นเป็นสิ่งสำคัญสำหรับความสำเร็จ ปฏิกิริยา PCR.

นอกจากนี้ หน้าที่ของบัฟเฟอร์ PCR คืออะไร? กันชน . PCR ดำเนินการใน กันชน ที่ให้สภาพแวดล้อมทางเคมีที่เหมาะสมสำหรับกิจกรรมของ DNA polymerase NS กันชน โดยปกติ pH จะอยู่ระหว่าง 8.0 ถึง 9.5 และ Tris-HCl มักจะทำให้เสถียร สำหรับ ตัก DNA polymerase ส่วนประกอบทั่วไปใน กันชน คือโพแทสเซียมไอออน (K+) จาก KCl ซึ่งช่วยส่งเสริมการหลอมของไพรเมอร์

เมื่อพิจารณาตามนี้แล้ว วิธี PCR คืออะไร?

PCR ( ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ) คือ กระบวนการ เพื่อวิเคราะห์ลำดับ DNA (หรือ RNA) สั้นๆ แม้ในตัวอย่างที่มี DNA หรือ RNA ในปริมาณเพียงเล็กน้อย PCR ใช้เพื่อทำซ้ำ (ขยาย) ส่วนที่เลือกของ DNA หรือ RNA PCR มีประสิทธิภาพสูงในการทำสำเนาดีเอ็นเอจำนวนนับไม่ถ้วน

PCR 4 ขั้นตอนมีอะไรบ้าง?

ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสในลำดับดีเอ็นเอ

  • ขั้นตอนที่ 1: การเปลี่ยนสภาพด้วยความร้อน: โดยปกติความร้อนจะมากกว่า 90 องศาเซลเซียสที่แยก DNA ที่มีเกลียวคู่ออกเป็นสองสายเดี่ยว
  • ขั้นตอนที่ 2: การอบสีรองพื้นตามลำดับเป้าหมาย:
  • ขั้นตอนที่ 3: ส่วนขยาย:
  • ขั้นตอนที่ 4: สิ้นสุดรอบ PGR แรก:

แนะนำ: